المبدأ الأساسي لتخليق الحمض النووي

يعتمد تخليق الحمض النووي الكيميائي على استراتيجية تخليق الطور الصلب وكيمياء الفوسفوراميت.تختلف المادة المستخدمة في تخليق الحمض النووي الكيميائي عن تخليق الحمض النووي البيولوجي، وهي DMT (4، 4-ديميثوكسيتريتيل) وديوكسي ريبوكسيسيد المعدل بالفوسفوراميديت، كما هو موضح في الشكل 1. يتم تنفيذ تخليق الحمض النووي على دعامة صلبة (يمكننا تقديم العديد منعمود التوليف Oligo)، أي CPG (الزجاج المسامي المتحكم فيه) وPS (البوليسترين)، ويتم إجراء التوليف بالكامل علىمركب DNA/RNA، وهي معداتنا الرئيسية، لديها نموذج مختلف مثل: مركب HY أحادي القناة، HY-12، HY-192 وغيرها، اتجاه التركيب من 3' إلى 5'، ويتم إدخال النوكليوتيدات إلى الدعم الصلب عبر واحد دورة التوليف.تحتوي دورة التوليف النموذجية على أربع خطوات، إزالة الحماية، والاقتران، والتغطية، والأكسدة (الشكل 2).يتم ضبط إزالة الحماية لإزالة مجموعة DMT على الدعامة الصلبة أو مجموعة الهيدروكسيل 5' على النيوكليوسيد السابق، ويتم استخدام حمض ثلاثي كلورو أسيتيك بنسبة 3% في ثنائي كلورو ميثان ككاشف إزالة الحماية.بعد ذلك تم السماح للديوكسي ريبوكسيسيد المعدل بالفوسفورميديت بتعريض مجموعة الهيدروكسيل بمساعدة المنشط، أي 5-إيثيل ثيوتيترازول أو 4، 5-ديسيانويميدازول، لتكوين الفوسفيتتريستر (III)، وتحقق خطوة الاقتران.يتم تنفيذ خطوة السد لمنع مجموعة الهيدروكسيل غير المتفاعلة أثناء خطوة الاقتران، لتقليل تكوين تسلسلات العيوب غير المرغوب فيها.وأخيرًا، يتم أكسدة الفوسفيتتريستر (III) غير المستقر إلى الفوسفيتتريستر المستقر كيميائيًا (V) مع وجود اليود كمادة مؤكسدة في وجود البيريدين.

يمكن أن يتم انقسام الحمض النووي المركب من الدعامة الصلبة عن طريق تحلل الأمينات، ويتم انقسام المجموعة المحمية 2-سيانو إيثيل الموجودة على الفوسفورتريستر والأميد الموجود على القاعدة النووية في نفس الوقت، ويتم وضع لوحات التركيب وأعمدة التركيب في الرفوف مباشرة في غرفة التفاعل التابعمعدات الحماية.يمكن تحضير الحمض النووي الخام بواسطة HPLC، والرحلان الكهربائي وOPC حسب الطلب، ويمكننا أيضًا أن نوفر لكمعدات التنقيةلمرحلة ما بعد المعالجة.