يعتمد كل من تخليق الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA على استراتيجية التخليق في الطور الصلب وكيمياء الفوسفوراميديت. يمكن استخدام جهاز تخليق الحمض النووي DNA لتخليق الحمض النووي الريبي RNA أو نظائره دون تعديل إضافي، ويمكن استخدام الكواشف المستخدمة في تخليق الحمض النووي DNA مباشرةً في تخليق الحمض النووي الريبي RNA والأحماض النووية الاصطناعية. كما هو موضح في الشكل 1، تتم حماية مجموعة الهيدروكسيل 2' في فوسفوراميديت الحمض النووي الريبي RNA بمجموعة حماية سيلالية، وهي ثالثي بوتيل ثنائي ميثيل سيليل (TBDMS)، مما يمنع التفاعلات الجانبية على مجموعة الهيدروكسيل 2' الهشة. تعيق مجموعة TBDMS الضخمة التفاعل بين الفوسفوراميديت ومجموعة الهيدروكسيل 5' على الدعامة الصلبة، ويتطلب ذلك وقت اقتران أطول لتحقيق كفاءة اقتران مُرضية.
على غرار عملية تخليق الحمض النووي، تم أولاً فصل الحمض النووي الريبي المُصنّع عن الدعامة الصلبة بواسطة التحلل الأميني، ثم تم فصل مجموعة TBDMS بواسطة فلوريد رباعي بوتيل الأمونيوم (TBAF) أو ثلاثي هيدروفلوريد ثلاثي ميثيل أمين. ويمكن تنقية الحمض النووي الريبي الخام عن طريق إعادة التبلور من الكحول والتحليل الكروماتوغرافي السائل عالي الأداء (HPLC).
الشكل 1. التركيب الكيميائي للوحدات البنائية الأساسية في تخليق الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA.
أ) فوسفوراميديت dABz و ب) فوسفوراميديت rABz 2'-OTBDMS.
يتطلب تطوير دواء siRNA استخدام نظائر بنيوية للحمض النووي الريبي الطبيعي لزيادة التوافق الحيوي، حيث يمكن استبدال مجموعة الهيدروكسيل 2' في الحمض النووي الريبي بمجموعات MeO وF وMOE، كما يُظهر الحمض النووي المقفل (LNA) أداءً جيدًا في العلاج بالحمض النووي الريبي (الشكل 2). تُعطي هذه الفوسفوراميديتات مواد فعالة مشابهة لتلك الموجودة في فوسفوراميديتات الحمض النووي DNA أثناء عملية التخليق، وتتشابه عملية معالجة وتنقية هذه الأحماض النووية غير الطبيعية مع عملية تنقية الحمض النووي DNA الطبيعي.
الشكل 2. التركيب الكيميائي للوحدات البنائية في أدوية siRNA. أ) فوسفوراميديت dABz 2-MeO؛ ب) فوسفوراميديت dABz 2-F؛ ج) فوسفوراميديت dABz 2-MOE؛ د) فوسفوراميديت dABz المقفل.
الفوسفوراميداتوهي ضرورية لتخليق الجينات، بما في ذلك بشكل رئيسي عائلات الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA ومشتقاتها، وكل الفوسفوراميديت المذكور أعلاه يمكننا تقديمه في حزمة واحدة.
نسعى باستمرار لتحسين أداء منتجاتنا، وتطوير عمليات الإنتاج، والاهتمام بأدق التفاصيل. لا نكتفي بتزويدكم بمنتجات عالية الجودة، بل نقدم لكم أيضاً التدريب والدعم الفني. لدينا فريق إدارة محترف، وفريق فني متميز، وفريق صيانة متخصص، لنضمن لعملائنا خدمة ما بعد البيع مثالية.
تاريخ النشر: 9 أغسطس 2022